海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因在大肠杆菌中的表达研究

为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b（＋）,电转重组质粒到宿主菌BL21（DE3）,在25℃0．5mmol／L IPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol／L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2＋离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。