β-银环蛇毒素A1链基因的克隆及序列分析 |
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引用本文: | 王佳美,李艳军,王惠芳,张金平,应天翼.β-银环蛇毒素A1链基因的克隆及序列分析[J].防化研究,2007(4):29-32. |
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作者姓名: | 王佳美 李艳军 王惠芳 张金平 应天翼 |
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摘 要: | 为制备β-BGTA1链重组蛋白并进一步开展β-BGT的生物活性研究,在大肠杆菌中克隆了D—BGTA1链基因,从银环蛇毒腺中提取总RNA,经反转录PCR获得银环蛇毒素cDNA.根据β-BGTA链基因的保守序列设计引物,以银环蛇毒素cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物连接到克隆载体pUCm-T,转入层coilTop10感受态细胞中,经蓝白斑筛选,PCR鉴定为阳性克隆后测序.测序证明获得了β-BGTA1链基因.测序获得的D—BGTA1链基因序列与文献报道的D—BGTA1链的基因序列一致.
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关 键 词: | PCR 蓝白斑筛选 阳性克隆 大肠杆菌 β-银环蛇毒素 A1链重组蛋白 |
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