葡萄球菌肠毒素B在大肠杆菌中的表达

应用DNA重组技术，构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b( )-SEB，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0．4mmol／LIPTG的诱导作用，可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明，重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中，表达SEB的量约占菌体总蛋白的30％左右。重组表达的SEB经HiTrap^TM chelating HP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。