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采用MA104细胞系培养和T载体克隆技术,在轮状病毒结构蛋白VP4基因序列中设计合成引物,经过PCR扩增后将特异性产物与pMD-19-T载体连接,对获得的轮状病毒重组质粒标准品进行酶切鉴定和测序分析。利用常规PCR和荧光定量PCR方法对获得的重组质粒标准品进行特异性和灵敏度指标的检验。结果表明,将构建的重组质粒作为标准品制备标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系(斜率为-4.015,R2=0.991);荧光定量PCR熔解曲线分析表明,85.8℃的PCR产物是轮状病毒VP4基因序列的特异性产物,该标准品具有轮状病毒特异性;同时,所制备的重组质粒标准品在荧光定量PCR检测中具有较大的线性范围(5×101~5×1010拷贝/μL),每个梯度PCR反应最低可以检测到50拷贝的重组质粒,因而采用该标准品进行荧光定量PCR分析具有较高的检测灵敏度;此外,该重组质粒标准品具有较高的稳定性和重复性,3次独立实验的变异因数Cv<1.5%。构建的重组质粒标准品可以用做环境水体中轮状病毒的荧光定量PCR标准品。 相似文献
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1949年,毛泽东主席深入研究当时国内的实际状况,并在党的七届二中全会上提出了“两个务必“的思想理念。2022年,习近平总书记在党的二十大报告上,针对当前形势下的新挑战和新要求,提出了“三个务必”这一具有里程碑意义的时代观点。“三个务必”以“两个务必”为基础,汲取毛泽东“两个务必”的精髓,并将其转化为“务必不忘初心、牢记使命”“务必敢于斗争、善于斗争”,呈现出一种全新的、充满活力的具有时代气息的思想理论。“三个务必”致力于保持中国共产党的核心领导地位,具有清晰的政治立场和鲜明的党的形象。将“三个务必”思想纳入了新时代中国的发展历程,具有十分重大和持久的战略影响。“三个务必”在新时代新征程中,展现了党的历史清醒和对未来的使命担当。 相似文献
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日本2001~2005年度的“新中期防卫力量发展计划”决定,分别于2004年和2005年开工建造2艘标准排水量13500吨的直升机驱逐舰。这实际上意味着,日本已正式启动打造新世纪航母编队的工程。多年郁积的航母情结世人皆知,二次大战时,以航母编队为核心力量的日本海军曾在太平洋称雄一时,而航母编队的被歼灭则成为日本战败的重要因素之一。因此,日本海上自卫队组建之 相似文献
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针对神经网络故障诊断专家系统在某型舰炮火控设备故障诊断中的应用,以系统自学习能力为主要指标,通过对系统的适应性和可拓展性检验方法的理论探讨和实例分析,衡量了基于神经网络的故障诊断专家系统的智能化水平,论证了系统的主要优越性,为系统实际应用奠定了基础. 相似文献
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在边境地区联合反击战役中,联勤分部的支援保障发挥着十分重要的作用。而联勤分部保障力量多元,指挥协调复杂,必须对保障活动实施高效指挥,才能对战役行动实施有效的支援保障。因此,联勤分部必须构建小型精干,反应灵活;关系顺畅,职权分明;动静兼备,灵活机动;综合防护,稳定可靠;编组科学,再生迅速的指挥机构。 相似文献
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试析越战"春节攻势"期间美国国内公共危机--传媒反战舆论报道评述 总被引:1,自引:0,他引:1
越南战争使美国陷入社会分裂,而新闻媒体则是焦点之一."春节攻势"是越南战争的转折点,原因是这场战斗在美国国内引发了一场公共危机."春节攻势"期间的传媒报道因此饱受指责.笔者试图撇开对传媒报道功过是非的直接评价来分析这场公共危机.媒体纷纷转向支持反战运动这一现象的出现并非偶然,它是统治阶级内部特别是老牌的东部权势集团和新兴的南部权势集团之间斗争的结果;当时人们对刚刚兴起的电视媒体的偏颇认识也影响了政府的决策以及公共危机的产生;约翰逊政府的拙劣表现对这场公共危机也负有不可推卸的责任.只有这样我们才能更加深刻地理解传媒报道同这场公共危机的关系. 相似文献