勒住安倍这匹奔向悬崖的“马”

“安倍曾说．要克服困难．像骏马一样勇往直前,但会不会因为速度过快把马背上的国民摔下来？”1月7日,日本《朝日新闻》刊文责问。     

轮状病毒荧光定量PCR标准品的构建

采用MA104细胞系培养和T载体克隆技术,在轮状病毒结构蛋白VP4基因序列中设计合成引物,经过PCR扩增后将特异性产物与pMD-19-T载体连接,对获得的轮状病毒重组质粒标准品进行酶切鉴定和测序分析。利用常规PCR和荧光定量PCR方法对获得的重组质粒标准品进行特异性和灵敏度指标的检验。结果表明,将构建的重组质粒作为标准品制备标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系(斜率为-4.015,R2=0.991);荧光定量PCR熔解曲线分析表明,85.8℃的PCR产物是轮状病毒VP4基因序列的特异性产物,该标准品具有轮状病毒特异性;同时,所制备的重组质粒标准品在荧光定量PCR检测中具有较大的线性范围(5×101~5×1010拷贝/μL),每个梯度PCR反应最低可以检测到50拷贝的重组质粒,因而采用该标准品进行荧光定量PCR分析具有较高的检测灵敏度;此外,该重组质粒标准品具有较高的稳定性和重复性,3次独立实验的变异因数Cv<1.5%。构建的重组质粒标准品可以用做环境水体中轮状病毒的荧光定量PCR标准品。     

浓缩富集＋基因芯片快速检测水体中致病菌

为了实现对水体致病菌的快速检测和监控，研究开发了一套预浓缩富集配合基因芯片检测的方法，对模拟和实际水样进行了检测，并与传统检测方法进行了比较。结果表明，通过对水样的浓缩集菌，基因芯片对致病菌的检出率（以肠炎沙门氏菌为单一检测对象）达到1．0×10^3cfu／mL，较原来提高了100倍；可以在8h内同步完成13种对人类有重大危害的致病菌的快速检测。