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为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin(Eb)的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b(+),电转重组质粒到宿主菌BL21(DE3),在25℃0.5mmol/L IPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol/L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2+离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。 相似文献
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△河南睢县榆厢乡白洼村青年民兵杜远,在自家的10亩承包田栽上了4500株杜仲幼树,并在行间套种上了白芍,还育了一万多株杜仲树苗。经过二年的精心 相似文献
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传统ADC主要依靠一揽子电阻网络来保证量化的精度,所以,其精度不可能做得很高。而∑-△A/D则转而依靠数字处理技术来提高精度。本文对低通∑-△调制器的原理作了较为详尽的分析,阐述了∑-△A/D的信号重构过程及其发展方向。 相似文献
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采用MA104细胞系培养和T载体克隆技术,在轮状病毒结构蛋白VP4基因序列中设计合成引物,经过PCR扩增后将特异性产物与pMD-19-T载体连接,对获得的轮状病毒重组质粒标准品进行酶切鉴定和测序分析。利用常规PCR和荧光定量PCR方法对获得的重组质粒标准品进行特异性和灵敏度指标的检验。结果表明,将构建的重组质粒作为标准品制备标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系(斜率为-4.015,R2=0.991);荧光定量PCR熔解曲线分析表明,85.8℃的PCR产物是轮状病毒VP4基因序列的特异性产物,该标准品具有轮状病毒特异性;同时,所制备的重组质粒标准品在荧光定量PCR检测中具有较大的线性范围(5×101~5×1010拷贝/μL),每个梯度PCR反应最低可以检测到50拷贝的重组质粒,因而采用该标准品进行荧光定量PCR分析具有较高的检测灵敏度;此外,该重组质粒标准品具有较高的稳定性和重复性,3次独立实验的变异因数Cv<1.5%。构建的重组质粒标准品可以用做环境水体中轮状病毒的荧光定量PCR标准品。 相似文献
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以苯酚为唯一碳源进行选择性富集培养,从油污染土壤中筛选出2株菌,命名为Phe0901和Phe0902。在32℃、pH值为7.0、200r/min摇床振荡培养72h,用4-氨基安替比林分光光度法测定2菌株培养液中苯酚含量,结果表明2株菌均能彻底降解初始质量浓度为1000mg/L的苯酚培养液,即Phe0901和Phe0902为苯酚降解菌。经形态学观察、生理生化实验及16SrDNA基因序列比对分析,初步确定Phe0901为假单胞菌属(Pseudomonas)成员;Phe902为芽孢杆菌属(Bacillus)成员。在不同温度下用比浊法探讨降解菌株的生长情况,在不同pH值下用4-氨基安替比林分光光度法测定苯酚降解率,结果表明在32℃、pH值为7.0~7.8时适宜Phe0901的降解,Phe0901培养44h能彻底降解1000mg/L的苯酚;在32℃、pH值为7.0时适宜Phe0902的降解,Phe0902培养70h能彻底降解1000mg/L的苯酚。 相似文献
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针对沙门氏菌的invA基因、金黄色葡萄球菌的nuc基因和志贺氏菌的ipaH基因分别设计LAMP引物,通过对实验条件和反应体系的优化,分析鉴定扩增产物,验证了LAMP方法的灵敏度及特异性,初步建立了针对三种致病菌的多重LAMP(m-LAMP)检测方法。分别对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的基因组DNA提取物梯度浓度稀释后进行实时荧光检测,结果表明:多重LAMP反应体系检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的敏感度均为10fg/反应。对目标菌和其他非目标菌的特异性检测均未出现假阳性和假阴性结果,并通过熔解温度曲线分析对目标菌的扩增产物进行初步鉴定。鉴定结果表明:该方法快速准确、简便高效、特异性强,可广泛应用于致病菌的筛选检测。 相似文献
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本文导出工质与三个热源间的传热系数分别为。α、β和γ,传热规律为q~∝△(T~(-1))时,内可逆三热源热泵的最佳供热系数ψ与供热率Π间的关系:ψ<1时,Π=K_1ψ[T_p(T_H-T_ο)-T_H(T_p-Tο)ψ]/[T_HT_pT_ο(1-△_1ψ)~2];ψ>1时,Π=K_2ψ[T_p(T_H-T_ο)-T_H(T_P-T_ο)ψ]/[T_HT_pT_ο(△_2-ψ)~2];式中,K_1=αγ/(α~(1/2)+γ~(1/2))~2,K_2=βγ/(β~(1/2)+γ~(1/2))~2,△_1=(α/β)~(1/2)(β~(1/2)-r~(1/2)/(α~(1/2)+γ~(1/2)),△_2=(β/α)~(1/2)(α~(1/2)-γ~(1/2))/(β~(1/2)+γ~(1/2))。由此可得许多有用的关系。 相似文献
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位于马里兰州的美国军事医学研究所,研究人员正在紧张地忙碌着。他们在普通酿酒菌中接入一种在非洲和中东引起可怕裂谷热的基因,使酿酒菌可以传播裂谷热。他们正在进行的研究是过去科幻小说中才有的基因武器。只要用多个罐子把100公斤炭疽芽胞散落在一个大城市,300万居民会立即毙命。威力比核弹大几十倍基因武器是生物武器中的新成员,它是运用遗传工程技术,采用类似工程设计的办法,根据作战需要,在一些致病菌或病毒中接入能对抗普通疫苗或药物的基因,产生具有显著抗药性的致病菌;或在一些本来不会致病的微生物体内接入致病基因,制造出新的生… 相似文献
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用热力学方法对化学反应进行研究和计算,可以得到该化学反应在一定条件下进行的方向和限度的判据,即化学反应的等温方程或称范特荷甫方程△rG_m=△rG_m~θ RT1-nQ_a。式中△rG_m为化学反应的摩尔吉布斯函数变量。这两个物理量的改变量有何异同?如何理解它们的物理意义?反应系统的△rG_m与热力学第二定律的△G有什么区别?化学反应为什么用△rG_m作判据而不用△G等问题,教材之中涉及的内容不多,而这些问题 相似文献
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王勇 《中国人民武装警察部队学院学报》1999,(2)
本文对在一定条件下,用标准吉布斯自由能变面△G~0、反应商(Q_p、 Q_c、 Q~0)、焓变(△H)、电池电动势(E)代替吉布斯自由能变△G判断反应自发方向进行了讨论。 相似文献
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简要介绍了近年来关于金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)及其突变体的基因位点、基因克隆和表达以及SEB的基因检测方法研究概况。 相似文献
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△夏邑县人武部采取措施认真抓好全县退伍军人小康户建设。一是举办技术培训班。每年对退伍军人进行10-15天的科学技术培训。二是在县、乡人武部小康户建设联系点上实行倾斜政策, 相似文献