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应用DNA重组技术,构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b( )-SEB,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0．4mmol／LIPTG的诱导作用,可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明,重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中,表达SEB的量约占菌体总蛋白的30％左右。重组表达的SEB经HiTrap^TM chelating HP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。 相似文献
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金联免疫检测是在快速ELISA检测方法基础上发展起来的更快捷、更灵敏的检测方法,包括斑点免疫金染色、斑点免疫金渗滤、金联免疫层析纸条等。在金联免疫实验的各步骤中,膜片的封闭是实验的关键,如果封闭不佳,会出现非特异性吸附,使阴性样本出现假阳性而影响结果的判断．为了选择最佳封闭条件,我们比较研究了去脂牛奶、牛血白蛋白、酪蛋白、人血清和明胶封闭对金联免疫显色结果的影响。 相似文献
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真核细胞表达载体在生物技术的许多领域都具有很好的应用前景,尤其在防化研究中的应用受到了各国军界的重视。对目前国内外真核表达载体的构建策略、IRES序列的应用及存在的问题进行了评述,并对其发展趋势进行了探讨。 相似文献
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2020年初新冠肺炎疫情的暴发与冲击,为高校思政课教学工作带来诸多需要厘革和教学升华的空间.高校思政课的教学实践应充分挖掘防疫精神的多维内涵,并将其纳入高校思政课教学线上线下的全过程.在高校思政课教学中,要牢牢把握微观视角,注重正确的价值导向,掌握顶层设计路径,构建立体化的高校整合平台,突破长三角地区融入常态化思维,厚... 相似文献
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