葡萄球菌肠毒素B的分子生物学研究进展

简要介绍了近年来关于金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)及其突变体的基因位点、基因克隆和表达以及SEB的基因检测方法研究概况。     

肠毒素性大肠杆菌CS6菌毛和霍乱毒素B亚基在人伤寒菌中共表达

构建了携带asd、霍乱毒素B亚基（CTB）基因的表达质粒,与人伤寒菌流行株Ty2的△aroA、△aroC和asd∧-三基因缺失空变体构成宿主-质粒平衡致死系统,用于在没有抗生素选择压力的情况下,稳定表达CTB及克隆在表达质粒上的外源抗原基因,并将肠毒素性大肠杆菌CS6菌毛抗原与CTB共表达。重组菌免疫家兔后可诱生相应的血清抗体,微量凝集实验显示组菌较好地保持了自身的免疫原性。为细菌性腹泻疫苗的研究提供了候选株。     

一种基于线性流形的基因表达数据的聚类方法

由于基因表达数据的稀疏性和噪声性,传统聚类算法对其聚类时不能取得好的效果。针对这一问题,一种新的线性流形方法被提出,它的基本思想是搜索数据集中的线流形聚类,再将其中某些线流形聚类融合构造高维流形聚类。该算法将切向距离和法向距离作为线性流形的距离度量,运用空间近邻信息,采用聚类基因的平均表达水平作为转移向量,提高了聚类的准确度。实验结果表明,该算法的聚类准确性优于其它聚类算法,并且对带有噪声的数据可以保持较高的聚类准确度;在对Hela基因表达数据聚类时,算法得到了具有显著生物学意义的聚类。这些都说明提出的算法对基因表达数据聚类的适用性和有效性。     

海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因在大肠杆菌中的表达研究

为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b（＋）,电转重组质粒到宿主菌BL21（DE3）,在25℃0．5mmol／L IPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol／L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2＋离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。