葡萄球菌肠毒素B的分子生物学研究进展

简要介绍了近年来关于金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)及其突变体的基因位点、基因克隆和表达以及SEB的基因检测方法研究概况。     

葡萄球菌肠毒素B在大肠杆菌中的表达

应用DNA重组技术,构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b( )-SEB,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0．4mmol／LIPTG的诱导作用,可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明,重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中,表达SEB的量约占菌体总蛋白的30％左右。重组表达的SEB经HiTrap^TM chelating HP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。     

κ—银环蛇毒素的研究进展

κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin，κ-BGT)是一种突触后神经毒素，由66个氨基酸残基组成，其结构中含有5个保守的二硫键，能选择性的识别α，β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体，与α—BGT有很高的同源性。在原核细胞及真核细胞中克隆表达的κ-BGT均具有一定的生物活性。     

直接免疫PCR方法的建立

免疫PCR基本原理与ELISA相似,即用一段可扩增的DNA分子代替ELISA中酶放大检出信号,建立了直接免疫PCR的检测蓖麻毒素技术,实验结果表明,其灵敏度达1pg／ml,比ELISA方法灵敏度高10^3倍.     

箭红气雾剂对N2O4中毒动物的急救效果评价

在完全相同条件下比较小白鼠对N2O4吸入中毒和用气雾剂对中毒小白鼠救治后的LC50值、肺脏器系数、肺体积系数和肺组织的病理变化。结果表明,箭红气雾剂能减低N2O4中毒小白鼠的死亡率及减轻由N2O4中毒所引起的损伤。     

受体生物传感器用于检测有毒物质的可能性

概要介绍了神经受体的性质,神经受体与天然毒素及有机磷毒剂的关系,对受体生物传感器研究中的某些问题进行了讨论,在新的形势下,积极创造条件,跟踪前沿科学,开展用于侦检毒剂毒物的受体生物传感器的研究是值得认真考虑的。     

乙酰胆碱受体生物传感器的研究概况

烟碱样乙酰胆碱受体对其配体,如毒素、许多化合物、农药、新的生物工程产品等具有高亲和性和选择性,乙酰胆碱受体生物传感器可检测一类物持它的应用,为生物传感器研究提供了一种良好的生物活性材料。近几年来,对神经受体生物传感器的研究比较活跃,本文主要介绍了烟碱样乙胆碱受体生物传感器研究的概况。     

β-银环蛇毒素A1链基因的克隆及序列分析

为制备β-BGTA1链重组蛋白并进一步开展β-BGT的生物活性研究,在大肠杆菌中克隆了D—BGTA1链基因,从银环蛇毒腺中提取总RNA,经反转录PCR获得银环蛇毒素cDNA．根据β-BGTA链基因的保守序列设计引物,以银环蛇毒素cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物连接到克隆载体pUCm-T,转入层coilTop10感受态细胞中,经蓝白斑筛选,PCR鉴定为阳性克隆后测序．测序证明获得了β-BGTA1链基因．测序获得的D—BGTA1链基因序列与文献报道的D—BGTA1链的基因序列一致．     

一种基于解析冗余关系的半定性故障隔离方法在航天器推进系统中的应用

针对航天器推进系统的时变特性以及随机因素给故障隔离带来的困难,提出了基于Z-检验分析和解析冗余关系相结合的半定性故障隔离方法。基于状态空间转换的思想,运用基于系统诊断键合图模型建立的解析冗余关系挖掘系统时不变的结构特征空间信息,并对解析冗余关系残差进行趋势分析获取时不变、具有残差变化方向的故障特征矩阵,针对存在随机因素对残差定性化的影响,利用了Z-检验分析对残差进行定性化获取观察特征,通过观测特征与故障特征的比较进行系统故障隔离。将该方法应用于推进系统的故障隔离中,结果证明了该方法能有效避免获取推进系统时变诊断准则以及来自系统建模和参数测量等随机因素的干扰,提高了推进系统故障隔离的鲁棒性。     

基于模糊模型的发动机部件级故障隔离方法研究

发动机故障诊断与故障隔离是发动机健康监控领域的一大难题,但对发动机故障定位、预防灾难性事故发生及发动机维修意义重大。为了准确地确定故障发生的部位,本文针对某型液体火箭发动机,提出一种基于模糊模型的部件级故障隔离方法。首先对发动机系统进行部件的划分,然后建立各个部件的模糊模型并进行训练,最后按照设定的故障检测与隔离策略对故障进行诊断。利用两组发动机故障仿真数据对基于模糊模型部件级故障隔离方法进行验证,结果表明:本方法可以实现单一或多个部件故障隔离。